Optimization of a molecular method for the diagnosis of canine babesiosis / Otimização de método molecular para diagnóstico da babesiose canina

Babesiosis is a hemolytic disease caused by protozoans of the genus Babesia (Apicomplexa). This disease occurs worldwide and is transmitted by ticks to a variety of mammals, including humans. The objective of the present study was to optimize a molecular approach for the detection of a fragment of 18S rDNA of Babesia canis, Babesia vogeli, Babesia rossi or Babesia gibsoni based on a single semi-nested Polymerase Chain Reaction (PCR), and compare the efficiency of this approach with that of a simple PCR protocol. To this end, 100 blood samples collected from dogs with suspected hemoparasite infections were analyzed. A comparison of the results of simple PCR and semi-nested PCR indicated a highly significant difference (p value = 0.0000). While only five (5%) of the samples tested positive using the simple protocol, 22 (22%) were positive using the snPCR technique. The results of this study reinforce the findings of previous studies, which have demonstrated the greater sensitivity of tests based on nested or semi-nested PCR. Therefore, to avoid false-negative results due to low levels of parasitemia, we suggest the preferential use of this protocol in epidemiological studies of canine babesiosis, particularly those that require reliable estimates of the prevalence of infection.

A babesiose é uma doença hemolítica de ocorrência mundial, causada por protozoários do gênero Babesia (Apicomplexa), que são transmitidos por carrapatos a diversos mamíferos, incluindo o homem. O objetivo deste estudo foi otimizar um método molecular para a detecção de fragmento do 18S rDNA de Babesia canis, Babesia vogeli, Babesia rossi ou Babesia gibsoni com base em uma única semi-nested (snPCR), comparando sua eficiência com um protocolo de PCR simples. Para isso, 100 amostras de sangue de cães com suspeita de hemoparasitoses foram analisadas e, enquanto o protocolo de PCR simples indicou somente 5% (5/100) de amostras positivas, o protocolo de snPCR, com 22% (22/100) de amostras positivas, apresentou maior sensibilidade (p valor = 0,0000). Este resultado está de acordo com outros estudos que mostram a maior sensibilidade de detecção dos testes baseado em nested ou snPCR. Assim, como uma forma de prevenir resultados falso-negativos devido à baixa parasitemia, sugere-se que este protocolo seja preferencialmente usado nos estudos epidemiológicos de babesiose canina, em especial naqueles que tratam da sua prevalência.

Leucemia linfocítica crônica em cão: relato de caso / Chronic lymphocitic leukemia in dog: case report

O presente relato refere-se a um caso de leucemia linfocítica crônica (LLC) diagnosticada no Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu, em um cão da raça Doberman, fêmea, com nove anos e oito meses de idade que apresentava anorexia e histórico de dificuldade locomotora. Ao exame físico observou-se hepato e esplenomegalia. O diagnóstico foi baseado nos resultados do hemograma (hemácias: 2,4 x 106/mL; hemoglobina: 5,6g/dL; hematócrito: 16 por cento), linfocitose (40,1 x 103/mL) e trombocitopenia (32,5 x 103/mL) e no exame citológico da medula óssea onde se observou celularidade aumentada com hipoplasia severa das séries megacariocítica, mielóide e eritróide. A série linfóide apresentou-se marcadamente aumentada, sendo representada principalmente por linfócitos pequenos e médios e em menor grau por plasmócitos.

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) was diagnosed in a 9-year-old-female Doberman Pinscher presented to the hospital of FMVZ - UNESP, Botucatu with anorexia and locomotion abnormalities. Clinical examination revealed hepato and splenomegaly. The diagnose was based on CBC results which showed anemia (RBC 2.4 x 106/mL; hemoglobin 5.6g/dL; PCV 16 percent), lymphocytosis (40.1 x 103/mL) and thrombocytopenia (32.5 x 103/mL) and in bone marrow evaluation which showed increased cellularity with severe myeloid, erythroid and megakaryocytic hypoplasia. The lymphoid series was marked increased, represented mainly by small and medium lymphocytes and occasional plasma cells.

Acesso vascular para hemodiálise com cateter temporário de duplo lúmen em cães com insuficiência renal aguda / Hemodialysis vascular access with temporary double-lumen catheter in dogs with acute renal failure

A hemodiálise é uma modalidade terapêutica que pode sustentar a vida do paciente com insuficiência renal aguda (IRA), enquanto este recupera a função renal. Para sua realização, é necessário estabelecer circulação extracorpórea, para que seja realizada a filtração do sangue, impondo a necessidade de um acesso vascular viável e eficiente. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência e as complicações do acesso vascular para hemodiálise (HD), com cateter temporário de duplo lúmen inserido na veia jugular externa. Foram estudados 10 cães com IRA induzida por gentamicina, submetidos a sessões diárias de HD, com duração de uma hora, até a recuperação da função renal ou óbito. Foram realizadas 104 sessões de HD nos animais estudados, observando-se necessidade de troca do cateter em sete sessões (6,7 por cento), devido à obstrução do lúmen do cateter em seis sessões (5,8 por cento) ou por saída acidental do mesmo em uma sessão (1,0 por cento). Não se observou migração do cateter, infecção, hemorragia ou hematoma no local de entrada do cateter na pele, obtendo-se fluxo sanguíneo patente em 90,4 por cento das sessões. Concluiu-se que o acesso vascular na veia jugular externa com cateter temporário de duplo-lúmen mostrou-se viável, com ocorrência de poucas complicações, sendo, portanto, indicado como forma de acesso para a circulação extracorpórea para HD em cães com IRA.

Hemodialysis is a therapeutic procedure that can sustain the patient's life in acute renal failure (ARF), during the renal function recover. To perform hemodialysis (HD), an extracorporeal circulation is established to blood filtration, imposing the need of a viable and efficient vascular access. The aim of this study was to evaluate the effectiveness and complications of the HD vascular access with temporary double-lumen catheter inserted into the external jugular vein. Ten mongrel dogs with ARF, induced by gentamicin administration, were submitted to daily hemodialysis for one hour, until renal function recover or death. A total of 104 HD sessions were performed. Catheter replacement was accomplished in seven sessions (6.7 percent), due to catheter lumen mechanical obstruction in six sessions (5.8 percent) or accidental catheter output in one session (1.0 percent). No catheter migration, infection, bleeding or haematoma around the catheter insertion site was found. Effective blood flow rates were observed in 90.4 percent HD sessions. In conclusion, the vascular access in jugular external vein with temporary double-lumen catheter was valuable, with few complications, and should be indicated to vascular access in extracorporeal circulation to HD in ARF dogs.

Avaliação da biocompatibilidade da membrana do dialisador em cães com insuficiência renal aguda induzida por gentamicina tratados por hemodiálise / Evaluation of the biocompatibility of the dialyzer membrane in dogs with acute renal failure induced by gentamicin treated by hemodialysis

A perda súbita da função renal, ou insuficiência renal aguda (IRA), é um síndrome que pode ocorrer em humanos e animais, podendo levar ao óbito. Procedimentos dialíticos como a hemodiálise (HD) podem sustentar a vida do paciente, até que haja recuperação da função renal. Diversos equipamentos são utilizados no tratamento dialítico, dentre eles os hemodialisadores, que são o centro do processo, classificados de acordo com o tipo de membrana que possuem. Existem diversas respostas biológicas estimuladas pelos hemodialisadores como ativação do complemento, alteração na cascata de coagulação e disfunções celulares diversas, que pioram o estado catabólico dos pacientes. Até o presente momento a controvérsia da biocompatibilidade do dialisador em pacientes com IRA permanece sem resolução. Este trabalho tem como objetivo avaliar a biocompatibilidade das membranas de acetato de celulose e polissulfona em cães normais e com IRA submetidos à hemodiálise, através das respostas biológicas e sinais clínicos presentes no processo. Os animais foram subdivididos em quatro grupos contendo 8 animais cada um, sendo o grupo 1 formado por animais normais hemodialisados com membrana de acetato de celulose; o grupo 2 formado por animais com IRA hemodialisados com membrana de acetato de celulose; grupo 3 formado por animais normais hemodialisados com membrana de polissulfona; e grupo 4 formado por animais com IRA hemodialisados com polissulfona. A indução da IRA foi realizada pela administração de gentamicina na dose de 45mg/Kg/dia via intravenosa, e o estabeleceu-se como momento para iniciar o procedimento hemodialítico quando o nível de creatinina sérica fosse maior ou igual 5,0mg/dL. A partir daí cada animal foi submetido a 5 sessões de hemodiálise, com intervalo de 24 horas entre cada sessão...